Determinacion de carbohidratos totales
En tubo de ensayo de vidrio borosilicato
1). 10 uL - 50 µL de muestra
2). 19 uL - 95 µL de agua bidestilada
3). 10 uL - 50 µL de fenol al 80% (80% de fenol en peso disuelto en agua)
4). Vortex.
5). 400 uL - 2000 µL de acido sulfurico concentrado.
6). Incubar a 22 ºC durante 10 min.
7). Transferir 150 µL a un pozo de una microplaca de 96 pozos
8). Leer la absorbancia a 490nm en el lector de ELISA.
9). Curva de calibracion: Glucosa 1 mg/mL, usar: 0,10, 20, 40, 60 80 y 100 µL y aforara con agua bidestilada a 100 µL
Referencia
Dubois M, Giles K, Hamilton JK, Rebes PA, Smith F. Colorimetric method for determination of sugars and relatessubstances. Anal Chem 1956;28:350-356.
1). 10 uL - 50 µL de muestra
2). 19 uL - 95 µL de agua bidestilada
3). 10 uL - 50 µL de fenol al 80% (80% de fenol en peso disuelto en agua)
4). Vortex.
5). 400 uL - 2000 µL de acido sulfurico concentrado.
6). Incubar a 22 ºC durante 10 min.
7). Transferir 150 µL a un pozo de una microplaca de 96 pozos
8). Leer la absorbancia a 490nm en el lector de ELISA.
9). Curva de calibracion: Glucosa 1 mg/mL, usar: 0,10, 20, 40, 60 80 y 100 µL y aforara con agua bidestilada a 100 µL
Referencia
Dubois M, Giles K, Hamilton JK, Rebes PA, Smith F. Colorimetric method for determination of sugars and relatessubstances. Anal Chem 1956;28:350-356.
2 Comments:
este documento esta bien estructurado pero le falta mas informacion
Cyndy
Sientete con la libertad para completarlo.
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