martes, enero 24, 2006

Determinacion de fosfato total

Determinacion de fosfato total
En tubo de esayo de vidrio borosilicado con tapa de rosca.

1). Prepare la curva estandar con fosfato de sodio en las siguientes concentraciones (uM): 0, 2, 5, 7, 10, 20, 40, 60, y 80 uM.
2). Deshidrate las muestras y los estandares con nitrogeno gaseoso en un evaporador.
3). 150 uL de acido perclorico al 70%.
4). Incube las muestras y estandares a 180 oC durante la noche o si los bloques son precalentados el tiempo de incubacion se puede reducir a 2 h.
5). Enjuage las paredes del tubo con 830 uL de agua ultrapura
6). Vortex7). 170 uL de molibdato de sodio al 2.5% (p/v)8). Vorex
9). 170 uL de acido ascorbico al 10% (p/v), preparese en fresco antes de usar.
10). Vortex.
11). Incubar a 50 oC durante 15 min.
12). Incubar a 22 oC durante 10 min.
13). Leer la absorbancia a 820 nm.