Tincion de azul coomassie para geles de poliacrilamida (PAGE)

Tincion, decoloracion y secado de geles de poliacrilamida (PAGE)


Para teñir el gel
1). Una vez que ha finalizado la corrida electroforetica, retirar el gel del casette y colocarlo en un recipiente hermetico de plastico (tuper)
2). Añadir 50 mL de la solucion de tincion
3). Incubar a 22 oC, 12 h, en agitacion continua

Para desteñir el gel
1). Incubar en 50 mL de solucion destiñidora durante una hora
2). Repetir el procedimiento dos o tres veces mas hasta que aparezcan las bandas teñidas de azul y el fondo casi transparente

Para secar el Gel
1). Incubar durante 12 h en glicerol al 20% en agua BD.
2). Fotografiar o escanear
3). Secar en el bastidor de acrilico a 22 oC durante dos o tres dias. (se puede acelerar el proceso si se le coloca un foco incandescente de 60 W lo mas cercano posible al gel, pero sin que llege a tocarlo).


Solucion de tincion
1). 2.5 g Azul Brillante Coomassie R-250
2). 450 mL metanol
3). 100 mL acido acetico glacial
4). Aforar a 1 L con agua BD
Nota: Esta solucion se puede recuperar y reusar nuevamnte si se filtra y se mezcla con la solucion de coomassie

Solucion destiñidora
1). 200 mL de metanol
2). 150 mL de acido acetico
3). 650 mL de agua BD
Nota: Esta solucion se puede recuerar y reusar si se filtra con un poco de carbon activado.