Determinación de albúmina

La albúmina es el mayor componente proteínico del suero. Siendo sintetizada en el hígado y con una gran capacidad de cambios en su configuración. Entre sus funciones se distinguen la regulación de la distribución del líquido extracelular, como fuente de de aminoácidos, como proteína de transporte de una variedad de sustancias tales como hormonas, lípidos, vitaminas, calcio, y otros metales.

Su disminución está asociada a procesos de sobrehidratación, pérdida de proteínas, disminución en la síntesis, o aumento en el catabolismo o degradación. Su aumento está relacionado con procesos de hemoconcentración, entre otros.

Los métodos más específicos para la determinación de albúmina son inmunológicos, tales como R.I.A.(radio inmuno ensayo), nefelometría, etc. También es utilizado como método la electroforesis de proteínas, pero este procedimiento tiene el inconveniente que la afinidad de los colorantes por la albúmina difiere de las globulinas.

Los métodos comúnmente utilizados se basan en la unión de albúmina a colorantes o indicadores, siendo el más común el que utiliza verde de bromocresol.

REACTIVOS
Verde de bromocresol, la absorbancia del reactivo contra blanco de agua a 620 nm., debe ser del orden de 0.150 D.O.

EQUIPO REQUERIDO
Espectrofotómetro o fotocolorímetro de filtros capaz de medir absorbancias a 620 nm. (rango 570 - 640 nm.), cronómetro y pipetas.

TÉCNICA
Llevar el reactivo a temperatura de reacción (18° - 25° C) antes de realizar el ensayo.

CALCULOS
Verificar la concentración del estándar en la etiqueta del frasco.

Albúmina (g/dL) = Factor x Absorbancia desconocido 

OBSERVACIONES:
- La reacción es lineal hasta 8.0 g/dL.

- Para valores superiores, diluir la muestra con solución fisiológica y el resultado obtenido se multiplica por el factor de dilución.

- En el caso de sueros hiperlipémicos, deberá hacerse un blanco muestra con solución fisiológico para eliminar la posible interferencia por la turbidez del suero.

RANGO DE REFERENCIA: 3.5 a 5.0 g/dL
(*) Se observan valores más bajos durante el embarazo, en los recién nacidos, y en los ancianos.

BIBLIOGRAFÍA

1. Doumas, B.T., Biggs, H.G., Standard Methods of Clinical Chemistry,Academic press,N.Y. 7(175), 1976.

2.  Henry, R.J., Clinical Chemistry, Principles and Technics.Harper and Row Publishers. New York,1964.

3. Young D.S., et al., Clin Chem. 21(10), 1975.



PROCEDIMIENTO

Blanco     Estándar     Desconocido

Muestra (mL)            --              --                0.01

Estandar (mL)          --              0.01             --

Reactivo (mL)          1.0            1.0              1.0

Mezclar e incubar 3 minutos a temperatura ambiente, y leer las absorbancias a 620 nm., llevando a cero el espectrofotómetro con el blanco de reactivos. El color resultante es estable por a lo menos treinta minutos. FACTOR = Concentración estándar / Absorbancia estándar. Componentes del reactivo: Verde de bromocresol 0.20 mM en buffer de succinato de sodio 100 mM a pH 3.8 Solución estándar:

Albúmina bovina, 10 mg/dL (Conservar entre 2° y 8°C. dura un mes, o menor aun a -20°C dura varios meses)

MUESTRAS
Se puede utilizar tanto suero como plasma. La albúmina es estable en suero o plasma una semana a temperatura ambiente y 1 mes a 4°C, y varios meses a -20°C.